Синтетикалық пестицидтерді кеңінен қолдану көптеген мәселелерге, соның ішінде төзімді организмдердің пайда болуына, қоршаған ортаның бұзылуына және адам денсаулығына зиян келтіруіне әкелді.Сондықтан адам денсаулығы мен қоршаған орта үшін қауіпсіз жаңа микробтық пестицидтер шұғыл қажет.Бұл зерттеуде Enterobacter cloacae SJ2 өндіретін рамнолипидті биосурфактант москит (Culex quinquefasciatus) және термит (Odontotermes obesus) дернәсілдерінің уыттылығын бағалау үшін пайдаланылды.Нәтижелер емдеу арасында дозаға тәуелді өлім-жітім деңгейінің бар екенін көрсетті.Термит пен москит дернәсілінің биосурфактанттары үшін 48 сағаттағы LC50 (50% өлімге әкелетін концентрация) мәні сызықты емес регрессия қисығын орнату әдісі арқылы анықталды.Нәтижелер биосурфактанттың ларвицидтік және антитермиттік белсенділігінің 48 сағаттық LC50 мәндері (95% сенімділік интервалы) сәйкесінше 26,49 мг/л (25,40-27,57 диапазон) және 33,43 мг/л (31,09-35,68 диапазон) болғанын көрсетті.Гистологиялық зерттеуге сәйкес, биосурфактивті заттармен емдеу дернәсілдер мен термиттердің органелла ұлпаларына қатты зақым келтірген.Бұл зерттеудің нәтижелері Enterobacter cloacae SJ2 өндіретін микробтық биосурфактанттың Cx бақылауының тамаша және ықтимал тиімді құралы екенін көрсетеді.quinquefasciatus және O. obesus.
Тропикалық елдерде шыбын-шіркей арқылы таралатын аурулардың көп саны кездеседі1.Масалар арқылы берілетін аурулардың өзектілігі кең таралған.Жыл сайын 400 000-нан астам адам безгектен өледі, ал кейбір ірі қалалар қанды безгегі, сары безгегі, чикунгуния және Зика сияқты ауыр аурулардың эпидемиясын бастан өткеруде.2 Вектор арқылы берілетін аурулар дүние жүзінде әрбір алтыншы жұқпалы аурумен байланысты, олардың көбін масалар тудырады. маңызды жағдайлар3 ,4.Culex, Anopheles және Aedes - аурудың таралуымен жиі байланысты масалардың үш тұқымы5.Aedes aegypti москиті арқылы таралатын қанды безгегінің таралуы соңғы онжылдықта артты және халықтың денсаулығына айтарлықтай қауіп төндіреді4,7,8.Дүниежүзілік денсаулық сақтау ұйымының (ДДСҰ) мәліметтері бойынша, әлем халқының 40%-дан астамы қанды безгегімен ауырады, жыл сайын 100-ден астам елде 50-100 миллион жаңа ауру пайда болады9,10,11.Денге безгегі денсаулық сақтаудың басты проблемасына айналды, өйткені оның ауруы бүкіл әлемде өсті12,13,14.Anopheles gambiae, әдетте африкалық Anopheles масасы ретінде белгілі, тропиктік және субтропиктік аймақтардағы адам безгегінің ең маңызды таратқышы болып табылады15.Батыс Ніл вирусы, Сент-Луис энцефалиті, жапон энцефалиті және жылқылар мен құстардың вирустық инфекциялары көбінесе қарапайым үй масалары деп аталатын Culex масалары арқылы таралады.Сонымен қатар, олар бактериялық және паразиттік аурулардың тасымалдаушысы болып табылады16.Дүние жүзінде термиттердің 3000-нан астам түрі бар және олар 150 миллион жылдан астам өмір сүрген17.Зиянкестердің көпшілігі топырақта өмір сүреді және құрамында целлюлоза бар ағаш және ағаш өнімдерімен қоректенеді.Үнді термиті Odontotermes obesus маңызды дақылдар мен екпе ағаштарға қатты зиян келтіретін маңызды зиянкес болып табылады18.Ауылшаруашылық аймақтарында әртүрлі кезеңдердегі термиттердің зақымдануы әртүрлі ауылшаруашылық дақылдарына, ағаш түрлеріне және құрылыс материалдарына орасан зор экономикалық зиян келтіруі мүмкін.Термиттер адам денсаулығына да зиян келтіруі мүмкін19.
Қазіргі фармацевтикалық және ауылшаруашылық салаларындағы микроорганизмдер мен зиянкестерге төзімділік мәселесі күрделі20,21.Сондықтан екі компания да жаңа үнемді микробқа қарсы препараттар мен қауіпсіз биопестицидтерді іздеуі керек.Синтетикалық пестицидтер қазір қол жетімді және олар жұқпалы және мақсатты емес пайдалы жәндіктерді итеретіні көрсетілген22.Соңғы жылдары биосурфактанттар туралы зерттеулер олардың әртүрлі салаларда қолданылуына байланысты кеңейді.Биосурфактанттар ауыл шаруашылығында, топырақты қалпына келтіруде, мұнай өндіруде, бактериялар мен жәндіктерді жоюда, тамақ өнімдерін өңдеуде өте пайдалы және өмірлік маңызы бар23,24.Биосурфактанттар немесе микробтық беттік белсенді заттар жағалаудағы мекендейтін жерлерде және мұнаймен ластанған аумақтарда бактериялар, ашытқылар және саңырауқұлақтар сияқты микроорганизмдер шығаратын биосурфактантты химиялық заттар болып табылады25,26.Химиялық жолмен алынған БАЗ және биосурфактивті заттар табиғи ортадан тікелей алынатын екі түрі болып табылады27.Әртүрлі биосурфактанттар теңіз мекендеу орындарынан алынады28,29.Сондықтан ғалымдар табиғи бактериялар негізінде биосурфактивті заттарды алудың жаңа технологияларын іздестіруде30,31.Мұндай зерттеулердегі жетістіктер бұл биологиялық қосылыстардың қоршаған ортаны қорғау үшін маңыздылығын көрсетеді32.Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium және осы бактериялардың тұқымдары жақсы зерттелген өкілдері23,33.
Қолдану аясы кең биосурфактанттардың көптеген түрлері бар34.Бұл қосылыстардың маңызды артықшылығы - олардың кейбіреулерінің бактерияға қарсы, ларвицидтік және инсектицидтік белсенділігі бар.Бұл оларды ауылшаруашылық, химия, фармацевтика және косметика салаларында қолдануға болатынын білдіреді35,36,37,38.Биосурфактанттар әдетте биологиялық ыдырайтын және қоршаған ортаға пайдалы болғандықтан, олар дақылдарды қорғау үшін зиянкестермен күресудің кешенді бағдарламаларында қолданылады39.Осылайша, Enterobacter cloacae SJ2 шығаратын микробтық биосурфактанттардың ларвицидтік және антитермиттік белсенділігі туралы негізгі білімдер алынды.Біз рамнолипидті биосурфактанттардың әртүрлі концентрацияларына әсер еткенде өлім мен гистологиялық өзгерістерді зерттедік.Сонымен қатар, біз микробалдырлар, дафниялар және балықтар үшін жедел уыттылықты анықтау үшін кеңінен қолданылатын Quantitative Structure-Activity (QSAR) Ecological Structure-Activity (ECOSAR) компьютерлік бағдарламасын бағаладық.
Бұл зерттеуде 30-дан 50 мг/мл-ге дейінгі (5 мг/мл аралықпен) әртүрлі концентрацияларда тазартылған биосурфактанттардың антитермиттік белсенділігі (уыттылығы) үнді термиттеріне, O. obesus және төртінші түрге қарсы сыналған. )Бағалаңыз.Cx дәуірінің дернәсілдері.Quinquefasciatus масаларының дернәсілдері.O. obesus және Cx қарсы биосурфактант LC50 концентрациясы 48 сағат ішінде.C. solanacearum.Масалардың дернәсілдері сызықты емес регрессия қисығын орнату әдісі арқылы анықталды.Нәтижелер термиттердің өлім-жітімінің биосурфактант концентрациясының жоғарылауымен жоғарылағанын көрсетті.Нәтижелер биосурфактанттың 48 сағаттық LC50 мәндері (95% CI) 26,49 мг/л (25,40 - 27,57) және 33,43 мг/ құрайтын ларвицидтік белсенділікке (1-сурет) және термитке қарсы белсенділікке (2-сурет) ие екенін көрсетті. l (31.09-35.68-сурет), тиісінше (1-кесте).Жедел уыттылық тұрғысынан (48 сағат) биосурфактант сыналған организмдер үшін «зиянды» болып жіктеледі.Осы зерттеуде өндірілген биосурфактант әсер еткеннен кейін 24-48 сағат ішінде 100% өліммен тамаша ларвицидтік белсенділікті көрсетті.
Лавицидтік белсенділік үшін LC50 мәнін есептеңіз.Салыстырмалы өлім-жітім (%) үшін сызықты емес регрессия қисығын орнату (тұтас сызық) және 95% сенімділік интервалы (көлеңкеленген аумақ).
Термитке қарсы белсенділік үшін LC50 мәнін есептеңіз.Салыстырмалы өлім-жітім (%) үшін сызықты емес регрессия қисығын орнату (тұтас сызық) және 95% сенімділік интервалы (көлеңкеленген аумақ).
Тәжірибе соңында микроскопта морфологиялық өзгерістер мен ауытқулар байқалды.Бақылау және өңделген топтарда 40 есе үлкейту кезінде морфологиялық өзгерістер байқалды.3-суретте көрсетілгендей, биосурфактанттармен өңделген личинкалардың көпшілігінде өсудің бұзылуы орын алды.3a суретінде қалыпты Cx көрсетілген.quinquefasciatus, 3b-суретте аномальды Cx көрсетілген.Бес нематод дернәсілдерін тудырады.
Culex quinquefasciatus личинкаларының дамуына биосурфактанттардың сублетальды (LC50) дозаларының әсері.40 × ұлғайту кезінде қалыпты Cx жарық микроскопиялық кескіні (a).quinquefasciatus (b) Қалыпты емес Cx.Бес нематод дернәсілдерін тудырады.
Осы зерттеуде өңделген дернәсілдерді (4-сурет) және термиттерді (5-сурет) гистологиялық зерттеуде іш аймағының қысқаруы және бұлшықеттердің, эпителий қабаттарының және терінің зақымдалуын қоса алғанда, бірнеше ауытқулар анықталды.ортаңғы ішек.Гистология осы зерттеуде қолданылатын биосурфактанттың тежеу белсенділігінің механизмін ашты.
Қалыпты өңделмеген 4-ші сатыдағы Cx дернәсілдерінің гистопатологиясы.quinquefasciatus личинкалары (бақылау: (a,b)) және биосурфактантпен өңделген (өңдеу: (c,d)).Көрсеткілер өңделген ішек эпителийін (эпи), ядроларды (n) және бұлшықетті (mu) көрсетеді.Бар = 50 мкм.
Қалыпты өңделмеген O. obesus гистопатологиясы (бақылау: (a,b)) және өңделген биосурфактант (емдеу: (c,d)).Көрсеткілер сәйкесінше ішек эпителийін (эпи) және бұлшықетті (mu) көрсетеді.Бар = 50 мкм.
Бұл зерттеуде ECOSAR рамнолипидті биосурфактант өнімдерінің бастапқы өндірушілерге (жасыл балдырлар), бастапқы тұтынушыларға (су бүргелері) және қайталама тұтынушыларға (балықтар) өткір уыттылығын болжау үшін пайдаланылды.Бұл бағдарлама молекулалық құрылым негізінде уыттылықты бағалау үшін күрделі сандық құрылым-белсенділік қосылыс үлгілерін пайдаланады.Модель суда тіршілік ететін түрлерге заттардың өткір және ұзақ мерзімді уыттылығын есептеу үшін құрылымдық белсенділік (SAR) бағдарламалық құралын пайдаланады.Нақтырақ айтсақ, 2-кестеде бірнеше түрлер үшін болжанған өлімге әкелетін орташа концентрациялар (LC50) және орташа тиімді концентрациялар (EC50) жинақталған.Күдікті уыттылық химиялық заттарды жіктеудің және таңбалаудың жаһандық үйлестірілген жүйесін қолдану арқылы төрт деңгейге жіктелген (3-кесте).
Векторлық аурулармен, әсіресе масалар мен Aedes масаларының штамдарымен күресу.Мысырлықтар, қазір қиын жұмыс 40,41,42,43,44,45,46.Пиретроидтер және органофосфаттар сияқты кейбір химиялық қол жетімді пестицидтер біршама пайдалы болғанымен, олар қант диабеті, ұрпақты болу бұзылыстары, неврологиялық бұзылулар, қатерлі ісік және тыныс алу органдарының аурулары сияқты адам денсаулығына айтарлықтай қауіп төндіреді.Оның үстіне, уақыт өте келе бұл жәндіктер оларға төзімді бола алады13,43,48.Осылайша, тиімді және экологиялық таза биологиялық күрес шаралары масалармен күресудің танымал әдісіне айналады49,50.Бенелли51 масалардың тасымалдаушыларымен ерте күресу қалалық жерлерде тиімдірек болады деп ұсынды, бірақ олар ауылдық жерлерде ларвицидтерді қолдануды ұсынбады52.Том және басқалар 53 сонымен қатар масаларды жетілмеген кезеңдерінде бақылау қауіпсіз және қарапайым стратегия болатынын ұсынды, өйткені олар бақылау агенттеріне 54 сезімтал.
Күшті штамм (Enterobacter cloacae SJ2) арқылы биосурфактантты өндіру тұрақты және перспективалы тиімділікті көрсетті.Біздің алдыңғы зерттеуіміз Enterobacter cloacae SJ2 физикалық-химиялық параметрлерді қолдана отырып, биосурфактантты өндіруді оңтайландыратынын хабарлады26.Олардың зерттеуі бойынша, потенциалды E. cloacae изолятымен биосурфактантты алудың оңтайлы шарттары 36 сағат бойы инкубациялау, 150 айн/мин араластыру, рН 7,5, 37 °C, тұздылық 1 ppt, көміртегі көзі ретінде 2% глюкоза, 1% ашытқы болды. .сығынды 2,61 г/л биосурфактантты алу үшін азот көзі ретінде пайдаланылды.Сонымен қатар, биосурфактанттар TLC, FTIR және MALDI-TOF-MS көмегімен сипатталды.Бұл рамнолипидтің биосурфактант екенін растады.Гликолипидті биосурфактанттар биосурфактанттардың басқа түрлерінің ең қарқынды зерттелген класы болып табылады55.Олар көмірсу және липидті бөліктерден, негізінен май қышқылды тізбектерден тұрады.Гликолипидтердің ішінде негізгі өкілдері рамнолипид пен софоролипид56.Рамнолипидтердің құрамында моно- немесе ди-β-гидроксидекан қышқылымен байланысқан екі рамноза бөлігі бар 57 .Медицина және фармацевтика өнеркәсібінде рамнолипидтерді қолдану жақсы жолға қойылған 58, сонымен қатар олардың соңғы уақытта пестицидтер ретінде қолданылуы 59.
Биосурфактанттың тыныс алу сифонының гидрофобты аймағымен әрекеттесуі судың оның устьтік қуысы арқылы өтуіне мүмкіндік береді, осылайша личинкалардың су ортасымен байланысын арттырады.Биосурфактанттардың болуы трахеяға да әсер етеді, оның ұзындығы жер бетіне жақын, бұл дернәсілдердің жер бетіне жорғалап, тыныс алуын жеңілдетеді.Нәтижесінде судың беттік керілуі төмендейді.Дернәсілдер су бетіне жабыса алмайтындықтан, олар резервуардың түбіне түсіп, гидростатикалық қысымды бұзады, нәтижесінде шамадан тыс энергия шығыны және суға батып өлу38,60.Ұқсас нәтижелерді Ghribi61 алды, мұнда Bacillus subtilis өндіретін биосурфактант Ephestia kuehniella-ға қарсы дервицидтік белсенділік көрсетті.Сол сияқты, Cx личинцидтік белсенділігі.Дас пен Мукерджи23 циклдік липопептидтердің quinquefasciatus личинкаларына әсерін де бағалады.
Бұл зерттеудің нәтижелері рамнолипидті биосурфактанттардың Cx қарсы ларвицидтік белсенділігіне қатысты.Quinquefasciatus масаларды өлтіру бұрын жарияланған нәтижелерге сәйкес келеді.Мысалы, Bacillus туысының әртүрлі бактериялары өндіретін сурфактин негізіндегі биосурфактивті заттар қолданылады.және Pseudomonas spp.Кейбір ерте есептер64,65,66 Bacillus subtilis23 липопептидті биосурфактанттардың дернәсілді өлтіру белсенділігі туралы хабарлады.Дипали және т.б.63 Stenotropomonas maltophilia-дан бөлінген рамнолипидті биосурфактант 10 мг/л концентрацияда күшті ларвицидтік белсенділікке ие екенін анықтады.Silva және т.б.67 рамнолипидті биосурфактанттың 1 г/л концентрациясында Ae-ге қарсы ларвицидтік белсенділігін хабарлады.Aedes aegypti.Канакданде және т.б.68 Bacillus subtilis өндіретін липопептидті биосурфактанттардың Culex дернәсілдері мен эвкалипттің липофильді фракциясы бар термиттердің жалпы өліміне себеп болғанын хабарлады.Сол сияқты, Масендра және т.б.69 жұмысшы құмырсқаның (Cryptotermes cynocephalus Light.) өлімі E. шикі сығындысының липофильді n-гексан және EtOAc фракцияларында 61,7% құрады.
Parthipan және т.б. 70 Bacillus subtilis A1 және Pseudomonas stutzeri NA3 өндіретін липопептидті биосурфактанттарды безгектің Plasmodium паразитінің векторы Anopheles Stephensi-ге қарсы инсектицидтік қолдану туралы хабарлады.Олар дернәсілдер мен қуыршақтардың биосурфактивті заттардың әртүрлі концентрацияларымен өңделген кезде ұзақ өмір сүретінін, жұмыртқа шығару кезеңдері қысқа болатынын, стерильді және қысқа өмір сүретінін байқады.B. subtilis биосурфактанты A1 байқалған LC50 мәндері әртүрлі дернәсілдік күйлер үшін (яғни дернәсілдер I, II, III, IV және сатыдағы қуыршақ) сәйкесінше 3,58, 4,92, 5,37, 7,10 және 7,99 мг/л болды.Салыстыру үшін, Pseudomonas stutzeri NA3 дернәсілінің I-IV және қуыршақ кезеңдері үшін биосурфактанттар сәйкесінше 2,61, 3,68, 4,48, 5,55 және 6,99 мг/л болды.Тірі қалған дернәсілдер мен қуыршақтардың кешіктірілген фенологиясы инсектицидтермен емдеуден туындаған елеулі физиологиялық және метаболикалық бұзылулардың нәтижесі болып табылады71.
Wickerhamomyces anomalus штамы CCMA 0358 Aedes масаларына қарсы 100% ларвицидтік белсенділігі бар биосурфактантты шығарады.aegypti 24 сағаттық интервал 38 Silva et al.Көміртек көзі ретінде күнбағыс майын қолданып, Pseudomonas aeruginosa-дан өндірілген биосурфактант 48 сағат ішінде личинкаларды 100% өлтіретіні көрсетілген 67 .Abinaya et al.72 және Pradhan et al.73 сонымен қатар Bacillus тектес бірнеше изоляттармен өндірілген беттік белсенді заттардың ларвицидтік немесе инсектицидтік әсерін көрсетті.Сентил-Натан және басқалардың бұрын жарияланған зерттеуі.өсімдіктер лагуналарына ұшыраған масалардың дернәсілдерінің 100% өлетінін анықтады.74.
Инсектицидтердің жәндіктер биологиясына өлімге әкелетін әсерлерін бағалау зиянкестермен күресудің кешенді бағдарламалары үшін өте маңызды, себебі сублетальды дозалар/концентрациялар жәндіктерді өлтірмейді, бірақ биологиялық сипаттарды бұзу арқылы болашақ ұрпақтағы жәндіктер популяциясын азайтуы мүмкін10.Siqueira және басқалар 75 50-ден 300 мг/мл-ге дейінгі әртүрлі концентрацияларда сыналған кезде рамнолипидті биосурфактанттың (300 мг/мл) толық ларвицидтік белсенділігін (100% өлім) байқады.Aedes aegypti штамдарының дернәсілдік кезеңі.Олар өлімге дейінгі уақыттың және сублетальды концентрацияның личинкалардың өмір сүруіне және жүзу белсенділігіне әсерін талдады.Сонымен қатар, олар биосурфактанттың сублетальды концентрациясына (мысалы, 50 мг/мл және 100 мг/мл) әсер еткеннен кейін 24-48 сағаттан кейін жүзу жылдамдығының төмендеуін байқады.Сублетальды рөлдері бар уланулар зиянкестерге көп зиян келтіруде тиімдірек деп саналады76.
Нәтижелеріміздің гистологиялық бақылаулары Enterobacter cloacae SJ2 өндіретін биосурфактанттардың москит (Cx. quinquefasciatus) және термит (O. obesus) дернәсілдерінің тіндерін айтарлықтай өзгертетінін көрсетеді.Осыған ұқсас аномалиялар Андағы насыбайгүл майының препараттарынан туындаған.gambiaes.s және An.arabica-ны Очола77 сипаттаған.Kamaraj et al.78 сондай-ақ Андағы бірдей морфологиялық ауытқуларды сипаттады.Стефанидің дернәсілдері алтын нанобөлшектердің әсеріне ұшырады.Vasantha-Srinivasan et al.79 сонымен қатар шопанның әмиян эфир майы Aedes albopictus камерасы мен эпителий қабаттарын қатты зақымдағанын хабарлады.Aedes aegypti.Рагавендран және басқалар масалардың дернәсілдері жергілікті Penicillium саңырауқұлақтарының 500 мг/мл мицелиалды сығындысымен өңделгенін хабарлады.Ae ауыр гистологиялық зақымдануды көрсетеді.aegypti және Cx.Өлім көрсеткіші 80. Бұрын Abinaya et al.Анның төртінші жастағы дернәсілдері зерттелді.Стефенси және Аэ.aegypti B. licheniformis экзополисахаридтерімен өңделген Aedes aegypti-де көптеген гистологиялық өзгерістерді, соның ішінде асқазанның соқыр қабығын, бұлшықет атрофиясын, жүйке сымының ганглийлерінің зақымдануын және дезорганизациясын анықтады72.Raghavendran және т.б. деректері бойынша, P.daleae мицелий сығындысымен өңделгеннен кейін сыналған масалардың (4-ші жастағы дернәсілдері) ортаңғы ішек жасушаларында ішек саңылауларының ісінуі, жасушааралық мазмұнның азаюы және ядролық дегенерация байқалды81.Дәл осындай гистологиялық өзгерістер эхинацея жапырағы сығындысымен өңделген масалардың дернәсілдерінде байқалды, бұл өңделген қосылыстардың инсектицидтік потенциалын көрсетеді50.
ECOSAR бағдарламалық құралын пайдалану халықаралық деңгейде мойындалды82.Қазіргі зерттеулер ECOSAR биосурфактанттарының микробалдырларға (C. vulgaris), балықтар мен су бүргелеріне (D. magna) өткір уыттылығы Біріккен Ұлттар Ұйымы анықтаған «уыттылық» санатына жатады83.ECOSAR экоуыттылық үлгісі заттардың өткір және ұзақ мерзімді уыттылығын болжау үшін SAR және QSAR пайдаланады және көбінесе органикалық ластаушы заттардың уыттылығын болжау үшін қолданылады82,84.
Параформальдегид, натрий фосфаты буфері (рН 7,4) және осы зерттеуде пайдаланылған барлық басқа химиялық заттар HiMedia Laboratories, Үндістаннан сатып алынған.
Биосурфактантты өндіру жалғыз көміртегі көзі ретінде 1% шикі маймен толықтырылған 200 мл стерильді Bushnell Haas ортасы бар 500 мл Эрленмейер колбаларында жүзеге асырылды.Enterobacter cloacae SJ2 прекультурасы (1,4 × 104 КҚБ/мл) егілді және орбитальды шайқағышта 37°C, 200 айн/мин 7 күн бойы өсірілді.Инкубациялық кезеңнен кейін биосурфактант культура ортасын 3400×г 20 минут бойы 4°C температурада центрифугалау арқылы экстракцияланды және алынған үстіңгі зат скрининг мақсатында пайдаланылды.Оңтайландыру процедуралары мен биосурфактанттардың сипаттамасы біздің бұрынғы зерттеуімізден қабылданған26.
Culex quinquefasciatus дернәсілдері Теңіз биологиясы бойынша кеңейтілген зерттеу орталығынан (CAS), Паланчипетай, Тамил Наду (Үндістан) алынды.Дернәсілдер 27 ± 2 ° C температурада және 12:12 фотопериодта (ашық: қараңғы) деионизацияланған сумен толтырылған пластикалық контейнерлерде өсірілді.Масалардың дернәсілдері 10% глюкоза ерітіндісімен қоректендірілді.
Ашық және қорғалмаған септиктерде Culex quinquefasciatus дернәсілдері табылған.Зертханада личинкаларды анықтау және өсіру үшін стандартты жіктеу нұсқауларын қолданыңыз85.Ларвицидтік сынақтар Дүниежүзілік денсаулық сақтау ұйымының 86 ұсыныстарына сәйкес жүргізілді.SH.Квинкефасциатустың төртінші жастағы дернәсілдері сыйымдылығының үштен екісі ауа саңылауымен 25 мл және 50 мл топтарда жабық түтіктерде жиналды.Биосурфактант (0–50 мг/мл) әр түтікке жеке қосылып, 25 °C температурада сақталды.Бақылау түтігі тек тазартылған суды (50 мл) пайдаланды.Өлген дернәсілдер инкубациялық кезеңде (12–48 сағат) 87 жүзу белгілерін көрсетпегендер деп саналды.Теңдеу арқылы дернәсілдердің өлу пайызын есептеңіз.(1)88.
Odontotermitidae тұқымдасына ауылшаруашылық кампусында (Аннамалай университеті, Үндістан) шіріген бөренелерден табылған үнді термиті Odontotermes obesus кіреді.Бұл биосурфактантты (0–50 мг/мл) зиянды екенін анықтау үшін қалыпты процедураларды қолданып сынаңыз.Ламинарлық ауа ағынында 30 минут кептіруден кейін ватман қағазының әрбір жолағы 30, 40 немесе 50 мг/мл концентрациядағы биосурфактантпен қапталды.Алдын ала қапталған және қапталмаған қағаз жолақтар Петри табақшасының ортасында сыналған және салыстырылған.Әрбір Петри табақшасында отызға жуық белсенді термиттер O. obesus бар.Бақылау және сынақ термиттеріне тамақ көзі ретінде дымқыл қағаз берілді.Барлық тақталар инкубациялық кезең бойы бөлме температурасында ұсталды.Термиттер 12, 24, 36 және 48 сағаттан кейін өлген89,90.Әртүрлі биосурфактант концентрацияларында термиттердің өлу пайызын бағалау үшін 1-теңдеу пайдаланылды.(2).
Үлгілер мұзда сақталды және құрамында 100 мл 0,1 М натрий фосфат буфері (рН 7,4) бар микротүтіктерге оралып, Раджив Ганди атындағы акваөсіру орталығының (RGCA) Орталық акваөсіру патологиясы зертханасына (CAPL) жіберілді.Гистология зертханасы, Сиркали, Майладутурай.Қосымша талдау үшін Үндістан, Тамил Наду ауданы.Үлгілер бірден 4% параформальдегидте 37°C температурада 48 сағат бойы бекітілді.
Бекіту кезеңінен кейін материал үш рет 0,1 М натрий фосфатты буферімен (рН 7,4) жуылды, этанолда кезең-кезеңімен сусыздандырылды және 7 күн бойы LEICA шайырына малынған.Содан кейін затты шайыр және полимеризатор толтырылған пластикалық қалыпқа салады, содан кейін заты бар блок толығымен полимерленгенше 37°С дейін қыздырылған пешке салады.
Полимерлеуден кейін блоктар LEICA RM2235 микротомының көмегімен (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, АҚШ) қалыңдығы 3 мм болатындай етіп кесілді.Бөлімдер слайдтарда топтастырылған, әр слайдта алты бөлім бар.Слайдтар бөлме температурасында кептірілді, содан кейін 7 минут бойы гематоксилинмен боялады және 4 минут бойы ағынды сумен жуылады.Сонымен қатар, эозин ерітіндісін теріге 5 минут бойы жағып, 5 минут бойы ағынды сумен шайыңыз.
Жедел уыттылық әртүрлі тропикалық деңгейлердегі су организмдерін қолдану арқылы болжалды: 96 сағаттық балық LC50, 48 сағаттық D. magna LC50 және 96 сағаттық жасыл балдырлар EC50.Рамнолипидті биосурфактанттардың балықтар мен жасыл балдырларға уыттылығы АҚШ Қоршаған ортаны қорғау агенттігі әзірлеген Windows жүйесіне арналған ECOSAR бағдарламалық құралының 2.2 нұсқасы арқылы бағаланды.(https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model сайтында онлайн режимінде қол жетімді).
Лавицидтік және антитермиттік белсенділікке барлық сынақтар үш данада жүргізілді.Личинка мен термиттердің өлу деректерінің сызықты емес регрессиясы (дозаға жауап беру айнымалыларының журналы) өлімге әкелетін орташа концентрацияны (LC50) 95% сенімділік интервалымен есептеу үшін орындалды және Prism® (8.0 нұсқасы, GraphPad Software) Inc. көмегімен концентрацияға жауап беру қисықтары жасалды. АҚШ) 84, 91.
Бұл зерттеу Enterobacter cloacae SJ2 шығаратын микробтық биосурфактанттардың масалардың личинцидтік және антитермиттік агенттері ретінде әлеуетін ашады және бұл жұмыс ларвицидтік және антитермиттік әсер ету механизмдерін жақсырақ түсінуге ықпал етеді.Биосүрфактанттармен өңделген дернәсілдердің гистологиялық зерттеулері ас қорыту жолының, ортаңғы ішектің, ми қыртысының зақымдануын және ішек эпителий жасушаларының гиперплазиясын көрсетті.Нәтижелер: Enterobacter cloacae SJ2 шығаратын рамнолипидті биосурфактанттың антитермиттік және ларвицидтік белсенділігін токсикологиялық бағалау бұл изоляттың масалардың (Cx quinquefasciatus) және термиттердің (O. obesus) векторлық ауруларымен күресу үшін әлеуетті биопестицид болып табылатынын көрсетті.Биосурфактанттардың негізгі экологиялық уыттылығын және олардың қоршаған ортаға ықтимал әсерлерін түсіну қажет.Бұл зерттеу биосурфактивті заттардың экологиялық қауіптілігін бағалаудың ғылыми негізін береді.
Жіберу уақыты: 09 сәуір 2024 ж